iPSCellⓇ报告基因 iPSC
该系列 iPSC 株携带有荧光蛋白、荧光素酶或膜蛋白作为报告基因,经过测试,报告基因在细胞内/外稳定表达。报告基因与特定谱系细胞特征性功能基因紧密关联,可用于谱系特异性分化方法开发或优化,或用于体内示踪,或其它需要可视化检测的研究。
具体来讲,可分别用于以下用途:
- 谱系特异性报告基因 iPSC :
通过基因编辑技术将报告基因(如 eGFP、mCherry 等)插入到特定谱系基因的启动子下游,使报告基因仅在 iPSC 分化为特定类型细胞时表达。这种类型的细胞株能够实时监测细胞分化过程,并富集特定谱系的细胞,是研究细胞分化、疾病建模、药物筛选、再生医学等领域的重要工具。
- 表达 eGFP 的 iPSC :
通过基因编辑技术在 AVVS1 位点定点插入 eGFP 作为报告基因,使细胞株在 iPSC 阶段和由 iPSC 分化得到的细胞中都能稳定表达绿色荧光。它可用于细胞追踪、疾病模型、药物筛选、组织工程、再生医学等研究领域。
- 荧光素酶标记的 iPSC :
通过转座子技术或者基因编辑技术,将荧光素酶基因随机或者定点插入到基因组中表达,以此来构建 iPSC 荧光素酶报告株。这个 iPSC 细胞系可以直接用于体内iPS残留和免疫豁免,也可以分化成特定细胞系来研究特定细胞系在动物模型内的药代与免疫豁免。如分化成 iNK 细胞,可以观察 iNK 细胞在小鼠模型内的存活以及归巢。荧光素酶报告株是研究目的细胞在体内存活和分布的重要工具。
货号 | 报告基因信息 | 基因型 | 规格 | 更多信息 |
---|---|---|---|---|
iPSM0040 | 报告基因eGFP 和 PURO 在NKX2.5外显子位置插入 | NKX2-5GFP-PruoR/wt | ~1E6 | 心脏谱系 |
iPSM0041 | AAVS1位点插入eGFP表达框 | Tg-eGFP | ~1E6 | iPSC及分化后稳定表达 |
iPSM0058 | ALB终止密码子位置分别插入mCherry和CD8 细胞中不含抗性基因 | ALBmCherry/CD8 | ~1E6 | 肝脏谱系 |
iPSM0059 | ASGR1终止密码子位置插入mCherry,无抗性基因 | ASGR1mCherry/mCherry | ~1E6 | 肝脏谱系 |
iPSM0060 | INS位点插入mCherry | INSmCherry/WT | ~1E6 | 胰腺谱系 |
iPSM0061 | 随机位点插入Luciferase表达框 | Tg-Luc | ~1E6 | Luciferase标记的WT iPSC |
iPSM0062 | 低免疫原性+自杀基因 | 未披露 | ~1E6 | 低免疫原性+自杀基因 |
iPSM0063 | 随机位点插入Luciferase表达框 | Tg-Luc | ~1E6 | Luciferase标记的iPSM0062 |
iPSM0064 | B2M,CIITA双基因敲除 | B2M-/-/CIITA-/- | ~1E6 | 抗T细胞排斥 |
iPSM0065 | 随机位点插入Luciferase表达框 | Tg-Luc | ~1E6 | Luciferase标记的iPSM0064 |
报告基因表达数据实例
1. eGFP 在 iPSM0041(Tg-eGFP)的 iPSC 中表达,流式细胞检测 iPSC 中 GFP 阳性率为99.4%;
eGFP 在 iPSM0041 分化的神经元、神经干细胞中也表达
eGFP 在 iPSM0041 分化的神经元、神经干细胞中也表达

2. eGFP 在 iPSM0040(NKX2-5GFP-PruoR/wt)分化的心肌细胞中表达

3. CD8、mCherry 在 iPSM0058(ALBmCherry/CD8)分化的3D肝脏细胞中表达

4. mCherry 在 iPSM0059(ASGR1mCherry/mCherry)分化的肝脏细胞中表达

5. mcherry 在 iPSM0060(INSmCherry/WT)分化的β细胞中表达
